Ocorrência de Babesia sp, Ehrlichia canis e Hepatozoon canis em cães domiciliados, em dois municípios do estado do Espírito Santo - Brasil / Occurrence of Babesia sp, Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in domiciled dogs in two municipalities of the state of Espírito Santo - Brazil / Ocurrencia de Babesia sp, Ehrlichia canis y Hepatozoon canis em perros domiciliados em dos municipios del estado de Espírito Santo - Brasil

As doenças transmitidas por carrapatos são afecções de grande importância na clínica médica de pequenos animais, devido à alta casuística e ampla distribuição vetorial no território brasileiro. Os principais agentes responsáveis pelas infecções em cães são Babesia sp., Ehrlichia canis e Hepatozoon canis. Os animais infectados são assintomáticos ou apresentam sinais clínicos inespecíficos, sendo necessário a utilização de testes diagnósticos para definição do agente etiológico, e diagnóstico seguro. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência desses micro-organismos em cães naturalmente infectados, domiciliados nos municípios de Vila Velha e Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes testes de detecção: Reação em cadeia polimerase (PCR), sorologia para detecção de anticorpos anti Ehrlichia canis e pesquisa de hematozoários em esfregaço sanguíneo. Foram analisadas 65 amostras de sangue obtidas por venopunção de veia cefálica de cães. No teste de PCR, 4,62% dos animais foram positivos para Babesia vogeli e 1,54% para Ehrlichia canis sendo os resultados para Hepatozoon canis negativos. No teste sorológico para E. canis 90,77% dos animais foram positivos para a presença de anticorpos, e na pesquisa em lâminas de esfregaço sanguíneo 3,02% apresentavam outros hemoparasitas. Os resultados indicam a dispersão desses hemoparasitas na população canina da região de estudo, entretanto com baixa ocorrência. O teste de PCR demonstrou-se como o mais sensível no qual Babesia vogeli foi o agente mais observado.(AU)

Tick-borne diseases are diseases of great importance in the medical practice of small animals, due to the high casuistry and wide vectorial distribution in the Brazilian territory. The main agents responsible for infections in dogs are Babesia sp., Ehrlichia canis and Hepatozoon canis. Infected animals are asymptomatic or present nonspecific clinical signs, requiring the use of diagnostic tests to define the etiologic agent, and safe diagnosis. The objective of the present study was to determine the occurrence of these microorganisms in naturally infected dogs domiciled in the municipalities of Vila Velha and Anchieta, Espírito Santo, using different detection tests: polymerase chain reaction (PCR), serology to detect antibodies against Ehrlichia canis and research of hematozoa in blood smears. Sixty-five blood samples obtained by venipuncture of the cephalic vein of dogs were analyzed. In the PCR test, 4.62% of the animals were positive for Babesia vogeli and 1.54% for Ehrlichia canis, and the results for Hepatozoon canis were negative. In the serological test for E. canis, 90.77% of the animals were positive for the presence of antibodies, and in the research in blood smear slides, 3.02% presented other hemoparasites. The results indicate the dispersion of these hemoparasites in the canine population of the study region, however with low occurrence. The PCR test proved to be the most sensitive, in which Babesia vogeli was the most observed agent.(AU)

Las enfermedades transmitidas por garrapatas son enfermedades de gran importancia en la práctica médica de los pequeños animales, debido a la alta casuística y amplia distribución vectorial en el territorio brasileño. Los principales agentes responsables de las infecciones en los perros son Babesia sp., Ehrlichia canis y Hepatozoon canis. Los animales infectados son asintomáticos o presentan signos clínicos inespecíficos, siendo necesario el uso de pruebas diagnósticas para la definición del agente etiológico, y el diagnóstico seguro. El objetivo del presente estudio fue determinar la ocurrencia de estos microorganismos en perros infectados naturalmente, domiciliados en los municipios de Vila Velha y Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes pruebas de detección: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), serología para detectar anticuerpos anti Ehrlichia canis e investigación de hematozoos en frotis de sangre. Se analizaron sesenta y cinco muestras de sangre obtenidas por venopunción de la vena cefálica de los perros. En la prueba PCR, el 4,62% de los animales fueron positivos para Babesia vogeli y el 1,54% para Ehrlichia canis, y los resultados para Hepatozoon canis fueron negativos. En la prueba serológica para E. canis, el 90,77% de los animales fueron positivos a la presencia de anticuerpos, y en la investigación en láminas de frotis de sangre el 3,02% presentaron otros hemoparásitos. Los resultados indican la dispersión de estos hemoparásitos en la población canina de la región de estudio, aunque con una baja presencia. La prueba PCR resultó ser la más sensible, en la que Babesia vogeli fue el agente más observado.(AU)

Rhabditis spp, in the Espírito Santo, State of Brazil and evaluation of biological control / Rhabditis spp, no Espírito Santo, estado do Brasil e avaliação do controle biológico

Abstract The objectives of this study were to describe occurrences of Rhabditis spp. causing parasitic otitis in dairy cattle of Gir breed in the state of Espírito Santo, southeastern Brazil, and to evaluate the biological control of this nematode using the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34). After nematode detection and collection, three groups were formed: two groups that were treated, respectively, with the fungal isolates; and a control group, without fungus. The treatments were as follows: (a) Petri dishes containing the culture medium 2% water agar (WA) + 250 nematodes + AC001; (b) Petri dishes containing 2% WA + 250 nematodes + NF34; and (c) Petri dishes containing only 2% WA + 250 nematodes. After seven days at 27 °C the treatments with fungi were able to capture and destroy the nematodes, with percentages of 82.0% (AC001) and 39.0% (NF34) in relation to the control group. The results demonstrate the occurrence of Rhabditis spp. after animals physical examination and that there was efficacy of the in vitro predatory activity of both fungal isolates. Thus, these results are important because they can assist in future in vivo control of this nematode in cattle.

Resumo Os objetivos neste estudo foram descrever ocorrências do nematódeo Rhabditis spp., causando otite parasitária em bovinos leiteiros da raça Gir no estado do Espírito Santo, sudeste do Brasil, e avaliar o controle biológico desse nematódeo utilizando os fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34). Após a detecção e coleta dos nematódeos, três grupos foram formados: dois grupos que foram tratados com os isolados fúngicos, respectivamente; e um grupo controle, sem fungos. Os tratamentos foram os seguintes: (a) placas de Petri contendo o meio de cultura 2% ágar de água (WA) + 250 nematoides + AC001; (b) placas de Petri contendo 2% de WA + 250 nematoides + NF34; e (c) placas de contendo apenas 2% de nematódeos WA + 250. Após sete dias a 27 °C os tratamentos com fungos foram capazes de capturar e destruir os nematódeos, com porcentagens de 82,0% (AC001) e 39,0% (NF34) em relação ao grupo controle. Os resultados demonstram a ocorrência de Rhabditis spp., no Estado do Espírito Santo e a eficácia da atividade predatória in vitro dos isolados fúngicos utilizados. Assim, esses resultados são importantes, pois podem auxiliar no controle alternativo in vivo de Rhabditis spp. em bovinos com otite parasitária.

Growth inhibition of Staphylococcus aureus and escherichia coli strains by neutralizing IgY antibodies from ostrich egg yolk

Ostrich raising around the world have some key factors and farming profit depend largely on information and ability of farmers to rear these animals. Non fertilized eggs from ostriches are discharged in the reproduction season. Staphylococcus aureus and Escherichia coli are microorganisms involved in animal and human diseases. In order to optimize the use of sub products of ostrich raising, non fertilized eggs of four selected birds were utilized for development of polyclonal IgY antibodies. The birds were immunized (200ug/animal) with purified recombinant staphylococcal enterotoxin C (recSEC) and synthetic recRAP, both derived from S. aureus, and recBFPA and recEspB involved in E. coli pathogenicity, diluted in FCA injected in the braquial muscle. Two subsequent immunization steps with 21 days intervals were repeated in 0,85% saline in FIA. Blood and eggs samples were collected before and after immunization steps. Egg yolk immunoglobulins were purified by precipitation with 19% sodium sulfate and 20% ammonium sulphate methodologies. Purified IgY 50µL aliquots were incubated in 850µL BHI broth containing 50µL inoculums of five strains of S. aureus and five strains of E.coli during four hours at 37ºC. Growth inhibition was evaluated followed by photometry reading (DO550nm). Egg yolk IgY preparation from hiperimmunized birds contained antibodies that inhibited significantly (p<0,05) growth of strains tested. Potential use of ostrich IgY polyclonal antibodies as a diagnostic and therapeutic tool is proposed for diseased animals.

Análise antigênica e molecular de amostras citopáticas do vírus da diarréia viral bovina / Antigenic and molecular analysis of cytopathic isolates of bovine viral diarrhea virus

Sete amostras citopáticas do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas de casos clínicos e do sangue de bezerros de rebanhos com problemas reprodutivos foram analisadas. Todas as amostras caracterizadas possuíam uma mistura de vírus citopáticos (cp) e näo-citopáticos (ncp), que foram clonados biologicamente, originando populaçöes puras de vírus de cada biotipo. Os clones cp e ncp obtidos foram caracterizados antigenicamente com um painel de anticorpos monoclonais (MAbs) e quanto à expressäo da proteína näo-estrutural NS3. A análise de reconhecimento pelos MAbs revelou dois padröes de reatividade: 1. Em cinco casos, os vírus cp e ncp de uma mesma amostra mostraram-se antigenicamente muito semelhantes entre si, indicando tratar-se de verdadeiros "pares" de vírus, nos quais o vírus cp origina-se do ncp através de mutaçöes ou recombinaçöes; 2. Duas amostras, no entanto, continham vírus cp e ncp com diferenças antigênicas consideráveis entre si. A análise de poliptídeos näo-estruturais das amostras ncp através de Western immunoblot revelou uma única banda de reatividade, de massa aproximada de 125kDa, correspondente à proteína näo-estrutural NS23. As amostras cp expressaram, além da NS23, um polipeptídeo de massa aproximada de 80kDa, correspondente à NS3. Duas amostras cp apresentaram diferenças na migraçäo da NS23. Uma amostra apresentou a NS23 com massa menor do que 125kDa, enquanto outra amostra apresentou duas bandas de reatividade, com massas menor e maior que a NS23 dos demais vírus, respectivamente. Esses resultados confirmam achados anteriores de que amostras de campo citopáticas do BVDV geralmente possuem vírus dos dois biotipos e que o fenótipo citopático está associado à expressäo da proteína NS3. O isolamento de amostras citopáticas do sangue de animais clinicamente normais de um feto, no entanto, demonstra que a ocorrência de vírus cp näo se restringe a casos da Doença das Mucosas.

Herpesvírus bovino tipo 1 (HVB 1): inquérito soro-epidemiológico no rebanho leiteiro do estado do Rio Grande do Sul, Brasil / Bovine herpesvirus type 1 (BHV 1): an epidemiological survey in the dairy herd of Rio Grande do Sul state, Brazil

Soros de 7956 bovinos leiteiros foram testados pela técnica de soro-neutralização para determinar a prevalência de anticorpos contra o Herpesvírus Bovino Tipo 1 (HVB 1). As amostras provinham de 99 municípios do Estado do Rio Grande do Sul. Os municípios foram agrupados em nove bacias leiteiras conforme critérios da Cooperativa Central Gaúcha de Leite (CCGL). A prevalência de anticorpos encontrada foi de 18,8 por cento. Dos 99 municípios testados 91 (91,9 por cento) apresentaram pelo menos um animal positivo e 8 (8,1 por cento) foram negativos. A maioria das bacias leiteiras apresentou uma prevalência semelhante à demonstrada pelo restante do Estado. A bacia 7, região de Passo Fundo apresentou a mais baixa prevalência (12 por cento) e a bacia 9, região de Quaraí, a mais alta (49,5 por cento). As amostras foram divididas em quatro grupos etários: animais até 2 anos, 2 a 4, 4 a 6 e maior que 6 anos. Observou-se que a prevalência aumentou com a idade, com a maior diferença verificada entre o primeiro e o segundo grupo e que a infecção ocorre com maior frequência em animais com mais de 2 anos. Não foi verificada diferença significativa entre título de anticorpos e idade dos animais. A grande relevância dos resultados está na prevalência comprovada de 54,5 por cento de propriedades positivas representando 371 de um total de 685 testadas no Estado. Levando-se em consideração os resultados deste inquérito pode-se afirmar que o Herpesvírus Bovino Tipo 1 encontra-se disseminado no rebanho bovino gaúcho. Medidas de prevenção e controle devem ser adotadas com urgência para impedir a progressão da infecção.

Sera samples of 7956 dairy catlle were tested with the serum neutralization test for antibody prevalence against Bovine Herpesvirus Type 1 (BHV 1). The samples were collected in 99 counties of the Rio Grande do Sul State. The counties were grouped in 9 dairy regions as determined by the "Cooperativa Central Gaúcha de Leite" (CCGL). The antibody prevalence among the 7956 será samples studied was 18.8 percent. The results demonstrated a similar antibody prevalence among the dairy regions. However, two regions had significant differences. Region 7 represented by "Passo Fundo" county had a prevalence of 12 percent and region 9 represented by "Quaraí" with the highest prevalence with 49.5 percent. The sera samples were divided into four groups according to cattle age: cattle with less than two years of age, 2 to 4, more than 4 to 6, and older than 6 years age. The results showed that the prevalence increases gradually with age. The major difference was between group 1 and 2. The results also demonstrated that the infection is more frequent in cattle older than two years. There was no significant difference among antibody titers between the age groups. The major relevance of the study was the prevalence of 54.5 percent positive herds, that represents 371 positive from a total of 685 herds tested. Considering this prevalence, it is clear that the BHV 1 is disseminated among the dairy population of the State. Prevention and control methods should be adopted so the spread of the infection can be withhold.